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24 avr.

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MEB

Techniques d'observation et de préparation en MEB

   1. Mode d'observation en Haut vide

   2. Mode d'observation à pression controlée (Low Vac)

   3. Mode d'observation environnemental (ESEM)

   4.  Analyse X

   

Observation en mode haut vide d'échantillons secs

Pour les échantillons hydratés il faut procéder au préalable à leur dessiccation par la technique du point critique.

Pour les échantillons non conducteurs, une métallisation est nécessaire.

 moucheron  Culture cellulaire
    Tête d'une mouche                                                         Glomérule reinal isolé et décapsulé                Lignée cellulaire cancéreuse HeLa en culture


   

Observation en mode haut vide d'échantillons congelés, utilisation du module de cryo-préparation

Module de cryo-préparation Quorum PP3000T

La métallisation est obligatoire
 

    ▓ Cryo-planning réalisé avec le cryo-ultramicrotome.


 Colon



    ▓ Surface d’échantillons congelés dans l'azote pâteux :

     
     Cryofixation dans l'azote pâteux                                           Pollens de Paquerettes



    ▓ Cryofracture:

        
             - soit après cryofixation dans l'azote pateux :

   
   Cryo-fracture de l'échantillon dans la chambre             Cryo-fracture d'un végétal
   du module de cryo-préparation PP3000T


 
 Réseau d'hydrogel colloïdal obtenu à partir d'un organogel
 S.Franceschi, E.Perez - Equipe SMODD - Laboratoire des IMRCP - Université Paul  Sabatier


- soit à la suite d'une cryo-fixation haute pression (Leica HPM 100):

   

   Cupule de cryo-fixation haute pression                              Formulation cryo-fixée (HPM100)
   Echantillon cryo-fixé au centre                                 

   

Observation en mode à pression contrôlée "low vacuum" d'échantillons secs non conducteurs

Les échantillons ne sont pas métallisés.

L'introduction dans la chambre d'un gaz (air) permet de neutraliser les électrons accumulés à la surface de l'échantillon non conducteur.

 
Intérieur d'un organogel poreux obtenu à partir d'un gabarit sucre glace, de l'huile de soja et de l'acide 12-hydroxystéarique comme gélifiant
S.Franceschi, E.Perez - Equipe SMODD - Laboratoire IMRCP - Université Paul Sabatier


   

Observation en mode environnemental (ESEM)

Observation sans aucune préparation préalable d'échantillons hydratés. L'échantillon est maintenu hydraté dans la chambre du microscope durant l'observation. Pour cela nous utilisons un vide peu poussé dans la chambre (environ 700 Pascal), une température failble (environ 2°C) et 98 % de vapeur d'eau. L'observation se fait cependant avec une forte perte de résolution par rapport aux deux autres modes.


    Diatoméées                                                                   Diatomées                                                                       Peau de souris

 


   

Analyse X

L’analyse élémentaire des échantillons peut être effectuée en mode haut vide et en mode à pression contrôlée.



Date de mise à jour 7 avril 2017


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